二氧化碳培养箱操作及注意事项
上海坤科仪器设备有限公司 / 2013-09-02
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二氧化碳培育箱是现代大中型医院进行科学研究必不可少的重要设备，散布于医院各个试验室。它经过在培育箱箱体内模仿构成一个相似细胞安排在生物体内的成长环境如安稳的酸碱度(pH值：7．2—7．4)，安稳的温度(37℃)，较高的相对湿度(95％)，安稳的二氧化碳水平(5％)，来对安排、细胞、细菌进行体外培育的一种设备。常用的二氧化碳培育箱有两种类型：气套式和水套式。二氧化碳培育箱有两条根本的需求：一是需求
二氧化碳培育箱能够对温度、二氧化碳浓度和湿度供给最准确安稳的操控，以便于其研究作业的发展；二是需求二氧化碳培育箱能够对培育箱内的微生物污染进行有用的防备，并能够定时消除污染，以维护研究成果，避免样品丢失。
1 二氧化碳培育箱根本作业原理
水套式二氧化碳培育箱的温度是经过电热丝给水套内的水加热，再经过箱内温度传感器来检测温度改变，使箱内的温度安稳在设置温度。气套式二氧化碳培育箱的加热是经过遍及箱体气套层内的加热器直接对内箱体进行加热的，又名六面直接加热。气套式与水套式比较，具有加热快，温度的康复比水套式培育箱敏捷的特色，格外有利于短期培育以及需求箱门频频开关的培育。箱内温度通常设定在37℃左右。二氧化碳培育箱操控二氧化碳的浓度是经过二氧化碳浓度传感器来进行的。二氧化碳传感器用来检测箱体内二氧化碳浓度，将检测成果传递给操控电路及电磁阀等操控器材，若是检测到箱内二氧化碳浓度偏低，则电磁阀翻开，二氧化碳进入箱体
内，直到二氧化碳浓度到达所设置浓度，此刻电磁阀封闭，箱内二氧化碳堵截，到达安稳状况。二氧化碳采样器将箱内二氧化碳和空气混合后的气体取样到机器外部面板的采样口，以随时用二氧化碳浓度测定仪来检测二氧化碳的浓度是不是到达需求。当前大多数的二氧化碳培育箱是经过增湿盘的蒸腾效果发作湿气的(其发作的相对湿度水平可达95％左右，但开门后湿度康复速度很慢)。因为湿度蒸腾面积越大，越简单到达最大相对饱和湿度而且开关门后的湿度康复的时刻越短。所以湿度蒸腾面积大的培育箱较湿度蒸腾面积小的培育箱简单保
持最大相对饱和湿度。
2 一定要做好运用前的准备作业
二氧化碳培育箱应由专人担任运用，操作盘上的任何开关和调理旋扭一旦固定后，不要随意扭动，避免影响箱内温度，二氧化碳浓度，湿度的动摇，一起下降机器的灵敏度。箱子的放置要水平，避免阳光直射和尘埃等，要确保仪器周围的气流循环，后部及旁边面应留出5 cm的空地。加装稳压电源确保电源电压动摇不超越220 V±10％。所参加的水有必要是蒸馏水或无离子水，避免矿物质储积在水箱内发作腐蚀效果，常常查看箱内水是不是满足，水位应加至“水位指示灯”灭灯时中止。运用前箱内运用消毒酒精或碘溶液完全擦洗，避免其他微生
物污染，致使试验失利。在房间设备空调，使环境温度保持在25~C左右。所运用的二氧化碳有必要是纯洁的，不然下降二氧化碳传感器的灵敏度和污染二氧化碳过滤设备。
3 正确充气延伸二氧化碳传感器运用寿数
二氧化碳培育箱箱内气压由二氧化碳气体传感器操控。二氧化碳传感器正常反应需求进气压为Medical Equipment Vo1．22，No．4 0．06 MPa。当箱内气压下降时，二氧化碳传感器在低压影响下有节奏地开闭，向箱内渐渐充气，当进气压达0．1 MPa时，主动中止调理。如充气办法不妥，使进气压力增大，当超越0．1 MPa乃至0．2 MPa压力，会损害二氧化碳传感器。开端这种损害效应不明显，不易发觉，重复错误操作，二氧化碳传感器损害累积结尾丧命损坏，使气压调理失灵。因而，二氧化碳传感器寿数与二氧化碳进气压巨细有关，只需做好进气压调理，就能维护二氧化碳传感器功用。二氧化碳传感器价格昂贵，替换不易，所
以一定要做好进气压调理，延伸二氧化碳传感器运用寿数。
4 做培育时注意培育箱湿度
箱内湿度关于培育作业来说是一项非常重要但是又常常被疏忽的要素。因为饱和湿度环境能够避免培育液中二氧化碳逃逸，培育液中pH值安稳，有利于细胞成长，满足的湿度水平而且要有满足快的湿度康复速度(如在开关门后)才干确保不会因为过度枯燥而致使培育失利。所以二氧化碳培育箱运用过程中，在箱内托盘中放一定量的灭菌水(3／2至全盘)，使箱内变成饱和湿度环境。如运用者忘掉补加水，使培育细胞处于低湿度乃至干热环境中，培育液二氧化碳气体易挥发，液体pH值升高，影响细胞成长，在作业中要力求避免此疑问发作。样本多时，箱内分区寄存，培育物用筐或瓷盘寄存，这样存取疾速，缩短开门时刻，削减箱内气体和湿度改变，节约气体，安稳了细胞成长环境。
5 避免二氧化碳培育箱污染做好箱内消毒二氧化碳培育箱污染是致使细胞培育失利的一个首要要素，所以要削减和避免污染的发作，首要路径是尽量削减微生物能够成长的区域和外表，采纳消毒办法。例如，对于箱内湿热环境易繁殖细菌等疑问，咱们采用在1000 mL水中加2 mL新洁尔灭液，定时用酒精和紫外线消毒箱内空气，培育物酒精擦洗人箱内，盘里的水至少要一周换一次，操控污染，能够保持习惯的蒸腾效果，削减箱内微生物繁殖速度。为了培育箱免受污染而且确保仪器箱体内的生物清洗性，有些二氧化碳培育箱描绘了主动扫除污染设备来有用避免污染的发作。当前有多种消毒灭菌方法，如带有紫外消毒功用的CO2培育箱。还有的描绘出产了HEPA过滤器能过滤培育箱内空气，可过滤除掉99．97％的0．3／an以上的颗粒，此外，还有描绘了能使箱内到达高温湿热的环境然后杀死污染微生物，到达消毒灭菌意图的培育箱。
6 二氧化碳培育箱零点飘移的监控和零点的调整培育箱运用过程中，二氧化碳零点会发作天然飘移表象，这种表象不能在箱面气体显现框中表现出来，运用者也不易觉察到飘移成果。二氧化碳零点是不是飘移，可经过二氧化碳气体测试仪，从操控盘上的采样口能够采到培育箱内的气体，然后用气体色谱仪就能够测到二氧化碳浓度了。二氧化碳培育箱零点的调整的过程(通常以空气为规范来校零，每半年进行一次，以Thermo3111型为例)：
(1)把二氧化碳浓度设定值设为零，意图是不让钢瓶中二氧化碳进入箱内。
(2)翻开一切的门5 min，往水盆内加上水，关上一切的门，安稳12 h以上。
(3)等温湿度充沛安稳后，调查二氧化碳浓度显现值是不是为零，若不为零，校对至零(按Mode
键至Cal档，按左键或右键挑选至显现“C02 CALX．X”，用上键或下键把数值调为零，然后按Enter键承认)。
(4)从头把二氧化碳浓度设定值设回(如5．0％)。
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